Proteinni qanday denatatsiya qilish kerak: 7 qadam (rasmlar bilan)

Mundarija:

Proteinni qanday denatatsiya qilish kerak: 7 qadam (rasmlar bilan)
Proteinni qanday denatatsiya qilish kerak: 7 qadam (rasmlar bilan)

Video: Proteinni qanday denatatsiya qilish kerak: 7 qadam (rasmlar bilan)

Video: Proteinni qanday denatatsiya qilish kerak: 7 qadam (rasmlar bilan)
Video: Prolonged FieldCare Podcast 127: Austere Dentistry 2024, Qadam tashlamoq
Anonim

Ehtimol, siz ilmiy loyiha uchun oqsilni denatatsiya qilmoqchisiz, yoki siz denaturatsiyalangan oziq -ovqat haqida o'qigansiz va bu qanday ishlashini bilmoqchisiz. Denaturatsiya - bu tashqi kuchlar, shu jumladan issiqlik, nurlanish, kislotalar va erituvchilar ta'sirida oqsil shaklini va tuzilishini yo'qotadigan jarayon. Organik erituvchilar odatda oqsillarni denaturatsiya qiladi. Proteinni denatatsiya qilishning aniq usuli siz bilan ishlashni xohlaganingizga bog'liq, chunki ularning har biri turli darajadagi denatürantlarni talab qiladi. Har qanday oqsilni denaturatsiyalash mumkin, lekin agar siz oqsil muhitida nima o'zgarishini bilsangiz.

Qadamlar

2 -usul 1: oqsilni denaturing

Proteinni denatatsiya qilish 1 -qadam
Proteinni denatatsiya qilish 1 -qadam

Qadam 1. Issiqlikdan foydalaning

Issiqlik - oqsilni denaturatsiyalashning eng oson va keng tarqalgan usullaridan biridir. Agar oqsil oziq -ovqatda mavjud bo'lsa, ovqatni oddiy pishirish oqsillarni denaturatsiyaga olib keladi. Ko'p oqsillarni 100 ° C (212 ° F) dan yuqori haroratga ta'sir qilish orqali denaturatsiyalash mumkin. Bu oqsillarga koagulyatsiya qilish va ularning eruvchanligini kamaytirish imkonini beradi.

EHMning davomiyligi siz isitayotgan narsaga bog'liq. Tuxum, masalan, skovorodkada o'rtacha olovda besh daqiqada pishirilishi mumkin, qovurilgan pechda esa bir necha soat pishishi mumkin

Proteinni denatatsiya qilish 2 -qadam
Proteinni denatatsiya qilish 2 -qadam

2 -qadam. Spirtli ichimliklarni qo'llang

Spirtli ichimliklar peptid aloqasining amid guruhlari o'rtasida paydo bo'ladigan vodorod aloqalarini buzadi. Protein spirtli eritma bilan ta'sirlanganda, spirt molekulalari oqsil zanjiri bilan yangi bog'lanishlar hosil qiladi. Bakteriyalarning hujayra devorini sindirish va oqsilni denatura qilish uchun 70% spirtli eritmadan foydalaning.

Konsentrlangan spirtlar xavfli bo'lishi mumkin, chunki ular yonuvchan va zaharli. Har doim qo'lqop va ko'zni himoya qiladigan to'liq xavfsizlik uskunalarini kiying va xavfsiz, harorat nazorat qilinadigan muhitda ushlang

Proteinni denatatsiya qilish 3 -qadam
Proteinni denatatsiya qilish 3 -qadam

3 -qadam pH ni o'zgartiring

Proteinning ichki tuzilishi, agar uning muhiti juda kislotali yoki ishqoriy bo'lsa, buzilishi mumkin, chunki ular oqsilning tuz ko'priklarini bir -biriga bog'lab turadigan ionli aloqalarni buzadi. Proteinga kislota yoki asosli eritma qo'shing. Atrofdagi muhit denaturatsiyani rag'batlantirish uchun pH 10 dan yuqori yoki 4 dan past bo'lishi kerak. Agar siz kislota bilan o'zgarishni boshlasangiz, pH 2 dan 5 gacha bo'lishi kerak.

PHni o'zgartirish aminokislotaning har bir funktsional guruhining pKa ga bog'liq holda, aminokislotani ionlashtirishi mumkin. Shuningdek, aminokislotada mavjud bo'lgan amino guruhini yoki karboksil guruhini ionlashtira olasiz

Proteinni denatatsiya qilish 4 -qadam
Proteinni denatatsiya qilish 4 -qadam

Qadam 4. Og'ir metall tuzlarini sinab ko'ring

Og'ir metallar oqsil tarkibidagi aloqalarni buzishi mumkin, bu uning tuzilishini yo'qotishiga olib keladi. Har xil oqsillarni denatura qilish uchun simob va qo'rg'oshin kabi og'ir metallarning tuzlaridan foydalanish mumkin. Bunday tuzlar kimyoviy etkazib beruvchilarning ko'pchiligida mavjud va ularni har doim ehtiyotkorlik va qo'lqop va ko'zdan himoya vositalari bilan ishlatish kerak.

Og'ir metallar oqsilning funktsional yon zanjir guruhlari bilan o'zaro ta'sirlashib, komplekslar hosil qilishi mumkin. Og'ir metallar oqsilning aminokislotalar yon zanjirlarini ham oksidlaydi

2 -usul 2: Proteinlarni qayta tiklash

Proteinni denatatsiya qilish 5 -qadam
Proteinni denatatsiya qilish 5 -qadam

Qadam 1. Proteinni qayta katlay olishini aniqlang

Denaturatsiyaning ba'zi shakllari doimiydir, boshqalarini qaytarish mumkin. Masalan, tuxum yoki go'shtni pishirishni ortga qaytarib bo'lmaydi, lekin yuqori pH ta'siriga uchragan oqsilni neytral muhitga qo'yganda shaklini qaytarishi mumkin.

Proteinning qayta tiklanishi mumkinmi yoki yo'qmi, uning DNKiga bog'liq bo'ladi. DNK oqsilning ona holatiga qaytishi uchun kerakli ma'lumotlarni saqlaydi

Proteinni denatatsiya qilish 6 -qadam
Proteinni denatatsiya qilish 6 -qadam

Qadam 2. Denaturing omilini olib tashlang

Protein atrofidagi muhitni turg'unlikka qaytaring va denaturing elementini olib tashlang. Masalan, kislota yoki asosni olib tashlang yoki oqsilni yanada oqilona haroratga keltiring.

Proteinni denatatsiya qilish 7 -qadam
Proteinni denatatsiya qilish 7 -qadam

Qadam 3. Renaturatsiya to'plamidan foydalaning

Ko'p laboratoriya ta'minoti kompaniyalari renaturatsiyani rag'batlantirish uchun eng yaxshi parametrlarni aniqlash imkonini beruvchi renatürasyon to'plamlarini sotadilar. Agar siz laboratoriya yoki eksperimental sharoitda oqsillarga qarasangiz, bunday to'plamlar ayniqsa foydali bo'lishi mumkin.

Maslahatlar

  • Denaturatsiyalangan oqsil to'rtinchi, uchlamchi va ikkilamchi tuzilishini yo'qotadi, lekin uning asosiy tuzilishi saqlanib qoladi.
  • Denaturatsiyalangan protein, shuningdek, ba'zi hollarda, fermentlar kabi, bioaktivligini yo'qotadi, ishlash qobiliyatini yo'qotadi. Masalan, substratlar endi denatüre qilingan fermentlar bilan bog'lana olmaydi.
  • Denaturatsiyalangan oqsil eritmadagi eruvchanligini yo'qotishi mumkin.
  • Iplarni ajratish uchun siz laboratoriya texnikasi yordamida nuklein kislotalarni ham denatura qilishingiz mumkin.

Tavsiya: